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細胞培養(yǎng)基解析預(yù)防污染的方法
更新時間:2014-08-05   點擊次數(shù):1345次

細胞培養(yǎng)基解析預(yù)防污染的方法

  細胞培養(yǎng)基受各種霉菌、細菌和支原體污染后,一般都較難排除或殺滅,其中以支原體更難排除,因此從預(yù)防著眼為上。

  1)抗生素除菌法:用BM-1(截耳素衍生物)和BM-2(四環(huán)素衍生物)抑制支原體

  1.抗生素制備:均可用PBS配成250×濃縮液-20℃?zhèn)溆谩?/p>

  2.處理:取受支原體污染的細胞,吸除培養(yǎng)液,加入含BM-1的1640培養(yǎng)液培養(yǎng)3天后,吸除培養(yǎng)液,再加入含BM-2的1640培養(yǎng)液培養(yǎng)4天,如此連續(xù)三個輪回。

  3.檢測:用33258熒光染色鏡檢(每個輪回末應(yīng)檢測一次)。

  4.培養(yǎng):清除支原體后的細胞,在不加上述抗生素的培養(yǎng)基液中,再傳代培養(yǎng)3~4次。

  5.鏡檢:如清除不*可再進行處理至純凈為止(一般3個輪回即能被*消除)。BM-1和BM-2與CIP(4-氟,2-羥基喹啉)聯(lián)合應(yīng)用亦可,即先用含BIP培養(yǎng)液培養(yǎng)12天后,再按上述方法處理。

  2)加溫除菌法

  把受污染的細胞置41℃中作用5~10小時。

  3)動物體內(nèi)接種除菌法

  把受支原體污染的腫瘤細胞接種在同種動物皮下或腹腔中,借動物免疫系統(tǒng)消滅支原體,而腫瘤細胞卻能在體內(nèi)繼續(xù)生長,待一定時間后,從體內(nèi)取出細胞培養(yǎng)基再進行培養(yǎng)繁殖。

  4)巨噬細胞吞噬法

  從動物腹腔采取巨噬細胞,為排除其它細胞成分,可先進行純化,然后再加入被支原體污染的細胞培養(yǎng)液中混合培養(yǎng)。在培養(yǎng)過程中,為檢查支原體是否已被消除干凈,可利用支持物培養(yǎng)法驗證,取出支持物逐日染色、鏡檢觀察,至支原體已被消除干凈為止。

炭疽桿菌檢測用配套試劑 培養(yǎng)基碘伏(液體) 500g
炭疽桿菌檢測用配套試劑 溶菌酶 2000萬單位/g
炭疽桿菌檢測用配套試劑 美藍(亞甲基藍) 25g
進口分裝,與HB116配套使用 水楊素 1g
用于分枝桿菌的分離培養(yǎng) MiddleBrook 7H10 Agar MiddleBrook 7H10 瓊脂 250
用于分枝桿菌的分離培養(yǎng) MiddleBrook 7H11 Agar MiddleBrook 7H11 瓊脂 250
用于分離培養(yǎng)和鑒別氣單胞菌 Aeromonas Differential Agar 氣單胞菌鑒別瓊脂  250
用于游泳池中假單胞菌檢測(Merck方法) Arginine Broth acc. To Schubert 精氨酸肉湯 250
用于曲霉菌分離培養(yǎng) 培養(yǎng)基曲霉素瓊脂基礎(chǔ)(AFPA) 250
用于假單胞菌群的測定 Pseudomonas Isolation Agar 假單胞分離瓊脂 250
用于假單胞菌群增菌培養(yǎng) Pseudomonas Isolation Broth 假單胞分離肉湯 250
用于嬰幼兒配方食品和乳粉中肌醇測定 Inositol Assay Broth 肌醇測定培養(yǎng)基 250
用于低酸性罐頭食品商業(yè)無菌檢驗(GB標準) Bromcresol Purple Dextrose Broth 溴甲酚紫葡萄糖肉湯 250
用于酸性缺罐頭食品商業(yè)無菌檢驗(GB標準) Acid Broth 酸性肉湯 250
用于嬰兒食品和乳粉中煙酸和煙酰胺測定 Vitamin PP Assay Broth 煙酸測定培養(yǎng)基 250
用于嬰兒食品和乳粉中葉酸測定 Folic Acid Assay Medium 葉酸測定培養(yǎng)基 250
用于嬰兒食品和乳粉中泛酸測定 Pantothenic Acid Assay Medium 泛酸測定培養(yǎng)基 250

 

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